النمو والعد البكتيري Microbial growth النمو الجرثومي

Preserving Bacteria Cultures طرق حفظ بيئات البكتريا - التجميد : من (-50ْ) الى (-95ْ). - التجفيد ( تجفيف بالتجميد ) : مجمد ( من -54ْ الى -72ْ س) ويجفف في انبوب موجود داخل اسطوانة بئية وبين جدار الاسطوانة فراغ .

Reproduction in Prokaryotes - بكتريا الانشطار الثنائي - بداية النمو / التبرعم (الخمائر ) - البوغ الغبيري (القوالب والخمائر) - تجزئة / تفتيت الشعيرات

Binary Fission الانشطار الثنائي الغشاء البلازمي جدار الخلية الحمض النووي (منطقة النواة) 1- يزداد طول الخلية و يتضاعف لحمض النووي بداية تكون الجدار الفاصل جدار الخلية الحمض النووي منطقة النواة 2- يبدأ كلا من جدار الخلية والغشاء البلازمي بالانشطان 3- يشكل الجدار الفاصل تماما حول الحمض النوي الممنشطر 4- تنفصل الخلايا قطاع الخلية الباسيل (بكتريا عصوبة الشكل ) تبدأ في الانشطار رسم تفصيلى يوضح مراحل انشطار الخلية Figure 6.11

الاسس العشري لعدد الخلايا عدد الخلايا رقم الجيل الاسس العشري لعدد الخلايا عدد الخلايا Figure 6.12b

If 100 cells growing for 5 hours produced 1,720,320 cells: اذا اسنحت الفرصة لعدد (100) خلية لتنمو لمدة (5) ساعات فانها تنتج (320-172) خلية : عدد الاجيال = الاس العشري لعدد الخلايا (في نهايتة ) – الاس العشري لعدد الخلايا (في بدايتة ) مدة الجيل = 60 دقيقة × عدد الساعات = 21 دقيقة / للجيل الواحد ـــــــــــــــــــ عدد الاجيال

الاس العشري لعدد الخلايا عدد الخلايا الاجيال Figure 6.13

مرحلة الوفاه أو مرحلة الهبوط اللوغارتمي المرحلة الثانية للنمو مرحلة النمو الاسي مرحلة الوفاه أو مرحلة الهبوط اللوغارتمي سجل اعداد البكتريا الوقت ( بالساعة ) Figure 6.14

Phases of Growth 4 Phases 1. Lag Phase 2. Log Phase مراحل / أشكال النمو (4) مراحل أشكال 4 Phases 1. Lag Phase 2. Log Phase 3. Stationary Phase 4. Death Phase 1- مرحلة النمو لمتباطئ 2- مرحلة النمو الاسي 3- مرحلة النمو الثانية 4- مرحلة الوفاة

1. Lag Phase مرحلة النمو المتباطئ - تقدم البكتريا اولا الى بيئة أو محيط . - تتفحص البكتريا البيئية المحيطة بها . - الخلايا نشطة جداص ايضاً . - هناك زيادة في احجام الخلايا ولكن لا توجد زيادة في عدد الخلايا - تستغرق تلك المرحلة مدة زمنية بين دقائق الى ساعات وقد تستمر لعدة ايام .

2. Log Phase 2- مرحلة النمو الاسي - يزداد معدل نمو الخلية بشكل سريع ( النمو الاسي ) . - يتضاعف عدد السكان مع كل جيل - في هذه المرحلة تكون الجراثيم حساسة للظروف المضادة . - المضادات الحيوية - عملاء مضادات الجراثيم

3. Stationary Phase - معدل الوفاة = معدل النمو 3- مرحلة النمو الثابتة - معدل الوفاة = معدل النمو - تبدأ الخلايا بمصادفة اجهاد بيئي - قلة المواد الغذائية - نقص المياه - ضيق المكان - تواجد التقايات الايضية - الاكسجين - معدل القلوية - يشكل الان في نهاية هذه المرحلة البوغ الداخلي للخلية

4. Death Phase - معدل الوفاة اكبر من معدل النمو 4- مرحلة الوفاة - معدل الوفاة اكبر من معدل النمو - نتيجة لعوامة بيئة محددة - الاخماد يمكن ان يحدث كنتيجة لتكون البوغ الداخلي

Limiting Factors in the environment - العوامل البيئة المحددة . - نقص الغذاء والماء والمواد المغذية - المكان - تراكم النفايات الايضية - نقص الاكسجين. - التغيير في معدل القلوية - درجة الحرارة .

Enumeration of Bacteria إحصاء البكتريا - النمو الجرثومي المكثف 10 مليون خلية بكترية في الملليمتر الواحد - التخفيف المتسلسل / المتنابع

Direct Measurements of Microbial Growth قياسات مباشرة للنمو الجرثومي Plate Counts: Perform serial dilutions of a sample طريقة حساب الطبق : تأدية تخفيفات متسلة لعينة مادة التلقيح الاحلية 9 مل من المرق في كل انبو التخفيفات Figure 6.15, top portion

Plate Count Inoculate Petri plates from serial dilutions طريقة الاحصاء بالطبق Inoculate Petri plates from serial dilutions تلقيح آطباق بترى من التخفيفات المتسلسة Figure 6.16

Plate Count After incubation, count colonies on plates that have 25-250 colonies (CFUs) مادة التلقيح الاصلية 9 مل مرق بكل انبوب - بعد الاحتضان ، قم بإحصاء المستعمرات في الاطباق التي بها 25-250 مستعمرة - الحساب : عدد المستعمرات في الطبق × التخفيف المتبادل العينة = عدد البكتريا في المل ( على سبيل المثال ، لون هناك 32 مستعمرة في طبق نتجية مقدار 1/10.000 من التخفيف المتبادل فإن العدد يصبح 32×10000= 32000/مل في العينة) Figure 6.15

Direct Measurements of Microbial Growth المقاييس المباشرة للنمو الجرثومي Filtration الترشيح Figure 6.17a, b

Direct Measurements of Microbial Growth المقاييس المباشرة للنمو الجرثومي Multiple tube MPN test Count positive tubes and compare to statistical MPN table. - اختبار الانبوب المتعدد - احسب الانابيب الايجابية وقارنها في جدول احصائي Figure 6.18b

Direct Measurements of Microbial Growth المقاييس المباشرة للنمو الجرثومي Direct Microscopic Count عدد البكتريا في الملليمتر الواحد = عدد الخلايا المحصاه ــــــــــ حجم المنطقة المحصاه

Direct Measurements of Microbial Growth المقاييس المباشرة للنمو الجرثومي شبكة مكونة من 25 مربع كبير غطاء زجاجي شريحة 1- يضاف هنا المزيج الجرثومي ويملا الحجم الضحل على المربعات بالخاصية الشعرية 3- الاحصاء الميكروسكوبي كل الخلايا في المربعات المتعددة الكبيرة تعد ويتم حساب المتوسط المربع الكبير الموضح هنا به 14 خلية بكترية Figure 6.19

Estimating Bacterial Numbers by Indirect Methods التعكر تقييم الاعداد البكترية بالطرق غير المباشرة Turbidity مقياس الطيف الضوئي مصدر ضوء ضوء مباشر النسبة المئوية للضوء المنقول فارغ كاشف حساس للضوء الضوء المبعثر الذي لم يصل لكاشف الضوء المزيج الجرثومي Figure 620

Estimating Bacterial Numbers by Indirect methods تقييم الاعداد البكترية بالطرق غير المباشرة Metabolic activity Dry weight - النشاط الايضي - الوزن الجاف