1. 关于氨基酸的 定量分析 03 化学 3 班 杨曦 03081095

2. 氨基酸的分析方法 化学分析法 —— 甲醛滴定法 甲醛滴定法用于氨基氮的 测定, 可以测出样品中总氨基酸 的含量, 其原理是在中性或弱碱 性水溶液中, 氨基酸的 α— 氨基与醛类反应生成 Schiff 碱 :α— 氨基酸与甲醛反应生成亚 甲基亚氨基衍生物

3. 亚甲基甲氨基衍生物用碱滴定, 从而得 到样品中总氨基酸的含量。 但是，甲醛法准确度差, 终点较难掌握。 我们还学过凯氏定氮法，测定样品中 总氮的含量。虽然准确度高, 但操作步骤 复杂, 试剂耗量多, 测定周期长。

4. 茚三酮是一种能使氨基酸生成在可见光区 有吸收的衍生试剂。该方法的基本原理是 经阳离子交换柱分离出的氨基酸与茚三酮 混合, 经加热反应后, 一级胺与之生成蓝紫色 化合物, 二级胺与之生成黄色化合物。两种 衍生物使用双通道紫外检测器同步检测, 检 测波长分别为 570nm 和 436nm 。 茚三酮 分光光度法 —— 茚三酮法 (nin - hydrin) :

5. 亮黄色化合物 紫色化合物

6. 衍生反应 溶液的 pH pH5 - pH6 的弱酸性 130 ℃

7. 茚三酮衍生显色反应的灵敏度可达 2 ×10 - 10 ～ 5 ×10 - 10 mol/ L, 衍生物 稳定性较好。衍生剂能同时与一级和 二级氨基酸反应并同步检测 但是，衍生反应条件要求较高, 需附 设加温衍生装置, 仪器造价高并专一 性强。分析时间长, 分析成本高, 工作 效率低。

8. 羊毛水解液中氨基酸含量的测定 氨基酸总的含量可以 用甲醛滴定法 —NH 2 与甲醛结合, 其 碱性消失。这样就可以 用碱来滴定 —COOH 基, 并用间接的方法测定氨 基酸的含量。 不同种类的氨基酸需 要用不同的方法来测 定，例如： 用三硝基苯磺酸法测定赖 氨酸 ……

9. L - 胱氨酸含量的测定 水解液 — 中和 — 沉淀过滤 — 粗品 — 酸溶 — 除 Fe 等杂 质 — 脱色 — 中和 — 沉淀过滤 — 干燥 — 精制品。 溴能将胱氨酸氧化成 α- 氨基 -β- 磺基 - 丙酸, 过量的溴又将碘化钾中碘 离子氧化成游离碘, 用碘量 法测定碘的量, 从而可进行 L - 胱氨酸的间接测定。 HO 2 S —CH 2 —CHNH 2 —COOH

10. 氢氧化钠溶液 :10 g/ L, 盐酸, 碘化钾溶 液 :450 g/ L, 用时配制, 溴液 : C(Br2) = 0.1 mol/ L, 称取 溴酸钾 3 g, 溴化钾 15 g, 加水溶解成 1 000 mL, 置于棕 色瓶中保存， 淀粉溶液 :5 g/ L, 新鲜配制, 硫代硫酸钠标准滴定溶液 : C(Na2S2O3) = 0.1 mol/ L 。

11. KBrO 3 + 5KBr + 6HCl ——3Br 2 + 6KCl + 3H 2 O S —CH 2 —CHNH2 —COOH 5Br 2 + ︱ + 6H 2 O S— CH 2 — CHNH 2 —COOH ——2HO 2 S —CH 2 —CHNH 2 —COOH+ 10HBr Br 2 + 2KI—— I 2 + 2KBr I 2 + 2Na 2 S 2 O 3 —— 2NaI +Na 2 S 4 O 6

12. 称取干燥后的试样 0.13 g ( 精确至 0.000 2 g), 加氢氧化钠溶液 10 mL 移入 100 mL 容 量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀。 吸取该溶液 25.0 mL 于碘量瓶中, 加溴液 50.00 mL, 加盐酸 10 mL, 立即加盖, 摇匀， 于暗处放置 10 min 再在冰浴中冷却 3 min 以上, 加碘化钾 5mL, 立即用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定至淡 黄色, 加入淀粉溶液 2 mL, 继续滴定至蓝色 消失为终点, 同时做空白试验。

13. V1 ——— 空白实验消耗硫代硫酸钠标准滴 定溶液的体积 / mL ; V2 ——— 试样滴定消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液 的体积 / mL ; C ——— 硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度 / mol/ L ; m ——— 试样的质量 / g ; 0. 024 03 ——— 与 1. 00 mL 硫代硫酸钠标准滴定溶 液 [ C(Na2S2O3) = 1. 00 mol/ L 相当的, 以 g 表示的 L - 胱氨酸的质量