علم الكائنات الحية المجهرية مبادئ كوخ لتشخيص مسببات امراض

الوفيات بشكل كبير واصبحت مساوية للنسبة في بقية الاقسام . في القرن التاسع عشر كانت نقلة في مجال البحث العلمي عن العلاقة بين البكتيريا والامراض حتى القرن التاسع عشر لم يُعرف اطلاقاً ان البكتيريا والكائنات الحية المجهرية الاخرى مسببة للامراض. ومنذ ذلك الحين بدا العلماء بفهم العلاقة بين الكائنات الحية والمجهرية والامراض . لقد عمل الطبيب النمساوي زيملفايس (1818–1865) في قسم الولادة في المستشفى. وقد لاحظ ان نسبة وفيات الوالدات, بسبب مرض سُمى ”حمى الوالدات“, لم يكن مسببه معروفًا في تلك الفترة , في القسم الذي يُشرف عليه الاطباء, اعلى من النسبة في القسم الذي تُشرف عليه القابلات. وقد استنتج انه يوجد شيء ما ينقله الاطباء من اقسام مختلفة الى قسم الوالدات, لكنه لم يعرف ما هو هذا العامل. وفي اعقاب ذلك اصدر تعليمات للاطباء بغسل ايديهم بمحلول الكلور قبل الدخول الى قسم الوالدات. وفعلاً انخفضت نسبة الوفيات بشكل كبير واصبحت مساوية للنسبة في بقية الاقسام . وعلى الرغم من ذلك فقد قوبلت توصياته برفض شديد من طرف الاطباء وفوق ذلك كُله اُقيل من عمله في المستشفى. الجراح الانجليزي ليستر , استنتج استنتاجات مشابهة بشان الحاجة الى التعقيم . ومن بين الاطباء الابرز في النصف الثاني من القرن التاسع عشر كان باستير وكوخ . هنري هيرمان روبرت كوخ (1843–1910) طبيب الماني, يعتبر من مؤسسي علم البكتريولوجيا , مكتشف مصدر مرض السل والحائز على جائزة نوبل للطب للعام 1905. وقد صاغ كوخ اربعة مبادئ ما زالت مستعملة حتى اليوم لاثبات ان كائن حي معين هو المسبب لمرض معين , وعن ذلك في الشريحة القادمة . كوخ زيملفايس מתוך ויקיפדיה העברית מתוך ויקיפדיה העברית

مبادىء كوخ لتشخيص مسببات الامراض ا. الكائن الحي المُشتبه به كمسبب للمرض يجب ان يتواجد لدى كل المصابين بالمرض . ب. يجب عزل الكائن الحي من اجسام المرضى وتنميته في مستنبت نقي . ت. عند حقن مسبب المرض من المستنبت النقي الى حيوانات فانها ستمرض بنفس مرض الحيوانات التي عُزل منها الكائن الحي. ث. يجب عزل الكائن الحي من اجسام الحيوانات التي اُعديت بالمرض وتنميته في مستنبت نقي واثبات انه مُطابق للكائن الحي الذي عُزل في المرة الاولى .

سؤال 1 : تطبيق مبادئ كوخ في بحث عن مرض قرحة المعدة سؤال 1 : بجروت 2007 حاز في سنة 2005 باحثان على جائزة نوبل في الطب على اكتشافهما بان قرحة المعدة يمكن ان يكون سببها البكتيريا. في الماضي كان من المقبول الاعتقاد بان قرحة المعدة سببها التوتر, لانه وُجدت تكرارية عالية لقرحة المعدة لدى اشخاص يعانون من التوتر. وجد الباحثون بكتيريا معينة أُخذت من مرضى بقرحة المعدة. قام الباحثان بعزل البكتيريا وتنميتها في وسط تنمية ووصل الامر باحد الباحثين ان يشرب من محلول احتوى على البكتيريا التي عُزلت ومَرِض بقرحة المعدة . ا. مجرى عمل الباحثين الذي وصف حتى الان يلائم المبادئ الثلاثة الاولى من مبادئ كوخ . اذكر ما هي المبادئ الثلاثة لكوخ واشرح ما هو العمل التالي الذي يجب القيام به حسب المبدأ الرابع . ب. اعتقد كوخ بان الكائن الحي الذي يسبب المرض يتواجد فقط عند المرضى وليس عند اشخاص معافيين. من المعروف اليوم ان الامر ليس صحيحاً دائماً . في عشائر معينة مثلاً تتواجد البكتيريا التي تسبب قرحة المعدة عند 30 % من العشيرة ولكن حوالي 10 % فقط من العشيرة مصابون بالمرض. اقترِح تفسيراً لهذه الحقيقة. بامكانك التطرق في اجابتك الى العلاقة بين التوتر وقرحة المعدة ايضاً . هليكوبكتر فلوري ( بكتيريا ذات شكل لولبي ) جرح معدة Courtesy Ed Uthman, MD, (Wikimedia commons) ©Yutaka Tsutsumi, M.D. Professor Department of Pathology Fujita Health University School of Medicine

اجابة سؤال 1 : بجروت 2007 ا. مجرى عمل الباحثين الذي وصف حتى الان يلائم المبادئ الثلاثة الاولى من مبادئ كوخ . اذكر ما هي المبادئ الثلاثة لكوخ واشرح ما هو العمل التالي الذي يجب القيام به حسب المبدأ الرابع . ب. اعتقد كوخ بان الكائن الحي الذي يسبب المرض يتواجد فقط عند المرضى وليس عند اشخاص معافيين. من المعروف اليوم ان الامر ليس صحيحاً دائماً . في عشائر معينة مثلاً تتواجد البكتيريا التي تسبب قرحة المعدة عند 30 % من العشيرة ولكن حوالي 10 % فقط من العشيرة مصابون بالمرض. اقترِح تفسيراً لهذه الحقيقة. بامكانك التطرق في اجابتك الى العلاقة بين التوتر وقرحة المعدة ايضاً . اجابة : ا. – الكائن الحي المشتبه به كمسبب مرض معين يجب ان يتواجد لدى جميع المصابين بالمرض . - يجب عزل الكائن الحي من جسم المريض وتنميته في مستنبت نقي . - عند حقن مسبب المرض من المستنبت النقي لحيوانات , فانها ستمرض بنفس المرض كالحيوانات التي عزل منها الكائن الحي . العمل القادم الذي يجب عمله : عزل البكتيريا من جسم الباحث الذي مَرِض , تنميته في مستنبت نقي وفحص فيما اذا كان مُطابقاً للبكتيريا التي عُزلت من اجسام المرضى , والتي حقنها الباحث لنفسه . ب. لا يُصاب كل من اُعدي بالمرض. هنالك تفاوت في الحساسية لمسبب المرض بين المرضى المختلفين. من الممكن انها مرتبطة بحالة الجسم , بمدى التوتر النفسي وبعوامل وراثية التي قد تؤثر على مدى صمود الجسم.

سؤال 2 سؤال 2: امتحان بجروت وجدوا في احد المحالب ان للبن من سلسلة الانتاج الاخيرة يوجد طعماً مرافقاً ليس طيباً . شكوُّا في مختبر المحلب ان بكتيريا معينة هي المسبب للطعم المرافق وأرادوا فحص ذلك . ا. كيف يمكن عزل البكتيريا من اللبن وتنميتها على انفراد ؟ ب. كيف يمكن الإثبات ان البكتيريا التي شكوا منها هي التي ادت الى الطعم المرافق ؟

اجابة + سؤال 3 ( مدمج مع طرق البحث العلمي ) سؤال 2: امتحان بجروت وجدوا في احد المحالب ان للبن من سلسلة الانتاج الاخيرة يوجد طعماً مرافقاً ليس طيباً . شكوُّا في مختبر المحلب ان بكتيريا معينة هي المسبب للطعم المرافق وأرادوا فحص ذلك . ا. كيف يمكن عزل البكتيريا من اللبن وتنميتها على انفراد ؟ ب. كيف يمكن الإثبات ان البكتيريا التي شكوا منها هي التي ادت الى الطعم المرافق ؟ اجابة : ا. يجب اخذ عيّنة من اللبن وزرعها على طبق بتري. يجب اخذ عّنة من كل واحدة من انواع المستعمرات التي ستتطور وزرعها بشكل منفرد بزراعة عزل , وتحديد البكتيريا التي شكوا فيها. ب. يجب غلي الحليب وان يُضاف له بكتيريا حامض الحليب فقط ( المنتجة للبن ) وكذلك البكتيريا التي شكوا فيها. وفي وعاء آخر يجب وضع الحليب وبكتيريا حامض الحليب فقط . يجب تذوق اللبن وملاحظة فيما اذا حصلوا على الطعم المرافق . سؤال 3:  ا. لماذا توجد حاجة لاضافة الوعاء الاضافي ( حليب وبكتيريا حامض الحليب ) ؟ ب. ما هي النتائج المحتملة , وماذا سيكون الاستنتاج فيما يتعلق بكل نتيجة محتملة ؟ * تمرين مهارات مطلوبة لامتحان البجروت في المختبر .

اجابة : ضرورة الضابط وشرح نتائج التجربة سؤال 3:  ا. لماذا توجد حاجة لاضافة الوعاء الاضافي ( حليب وبكتيريا حامض الحليب ) ؟ ب. ما هي النتائج المحتملة , وماذا سيكون الاستنتاج فيما يتعلق بكل نتيجة محتملة ؟ اجابة : ا. الوعاء الاضافي مخصّص للمراقبة ( ضابط ), ويختلف عن التجربة بالعامل المفحوص, وهو اضافة البكتيريا التي شكوا فيها. الاختلاف بين نتائج التجربة ونتائج المراقبة يُمكِّن من تحديد فيما اذا كانت البكتيريا هي التي سببت الطعم المرافق. ب. نتائج محتملة واستنتاجات ( على فرض انه لم يكن في الحليب كائنات حية مجهرية اخرى عدا تلك التي اضيفت ) : تجربة مراقبة استنتاج يوجد طعم مرافق لا يوجد طعم مرافق البكتيريا التي شكوا فيها هي المسبب للطعم المرافق . البكتيريا التي شكوا فيها ليست سبب الطعم المرافق. يجب فحص بطريقة مماثلة بقية الكائنات الحية المجهرية التي كانت في الحليب . لسبب ما فان بكتيريا حامض الحليب هي التي ادت الى الطعم المرافق او ان مصدر الطعم مادة معينة كانت في الحليب .