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实验一、光学显微镜使用 及显微摄影技术
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一、实验目的 1.了解显微镜各部分的名称、结构和功能,学习普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、微分干涉差显微镜、倒置显微镜、显微操作仪等的构造和使用方法。 2 .掌握显微摄影的基本方法,学会显微镜的视差校正,曝光控制
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1、普通光学显微镜
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Light Pathway of Microscope
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其中λ为入射光线波长;N.A.为镜口率 =nsinα/2,n=介质折射率;α=镜口角(样品对物镜镜口的张角) 。
分辨力等于光点爱里圆盘的半径 R=0.61λ/N.A. 其中λ为入射光线波长;N.A.为镜口率 =nsinα/2,n=介质折射率;α=镜口角(样品对物镜镜口的张角) 。
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两个最近可分辨光点的爱里圆盘 思考:如何提高显微镜的分辨能力?
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2、荧光显微镜 Fluorescence microscope
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3、暗视野显微镜 dark field microscope
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4、相差显微镜
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用途:观察未经染色的玻片标本
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5、微分干涉差显微镜 Differential interference contrast microscope (DIC)
1952年Nomarski发明。
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6、倒置显微镜 inverse microscope
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7、显微操作仪
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转基因显微操作过程
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8、透射电子显微镜 TEM TEM LIGHT PATHWAY
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TRANSMISSION ELECTRON
MICROSCOPE,TEM
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扫描电子显微镜 SEM
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SEM LIGHT PATHWAY
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二、传统胶片显微摄影过程 显微摄影装置的安装与调试 ↓ 显微镜的光路调整 装入胶片 取景聚焦
暴光: 1/15sec(应先测光:绿灯亮可以正确暴光) 黑白胶片的冲洗:显影 3min→停显 10sec→定影 15min→水洗:流水冲洗30min →晾干 印相放大:取景聚焦→暴光→显影 →停显 10sec→定影 15min→水洗:流水冲洗30min 上光剪切
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