1. سد خونی- مغزی

2. تکنولوژی نمایش فاژی و کاربرد آن

3.  مقدمه و تاریخچه  نمایش فاژی در تولید آنتی بادی مونوکونال

4. مقدمه و تاریخچه ▪ در سال 1985 جورج اسمیت Goerge Smith تکنیکی را بنا نهاد که بر اساس آن محققین می توانند برهم کنش بین میلیارد ها پپتید مختلف را با لیگاند مربوطه را مطالعه کنند. ▪ امروزه این روش کاربرد های گوناگونی در زمینه واکنش لیگاند – رسپتور و مهارکننده که اساس آن پروتئین – پروتئین اینراکنش است، پیدا کرده است. ▪ هم چنین در تولید آنتی بادی های مونوکلونال برای اهداف تحقیقی و درمانی نیز کاربرد های فراوانی یافته است.

5. ادامه ▪ اساس تکنیک نمایش فاژی به کارگیری فاژهای خانواده Ff( اغلب فاژهای رشته ای مانند f1, fd, M13) که فاژهای خطی می توانند پپتید های کوچک را به عنوان بخشی از پروتئین های خود بیان می کنند. ▪ پروتئین VIII که در بدنه فاژ قرار می گیرد و تعداد آن بسیار زیاد است، پروتئین III و VI که در یک سر ذره فاژی به تعداد 5 نسخه قرار می گیرد و پروتئین VII و IX که در سر دیگر فاژ به همان تعداد 5 نسخه وجود دارد. ▪ برای انجام این تکنیک کافی است تنها توالی تصادفی DNA در درون فاژ در جای مناسب از یکی از این ژنها کلون نماییم.

6. Phage display formats

8. نمایش فاژی در تولید آنتی بادی مونوکونال ▪ با این روش می توان برای انتخاب آنتی بادی اختصاصی آنتی ژن، طی مراحل غنی سازی طی مرحله غنی سازی از کتابخانه آنتی بادی مورد نظر است. ▪ در این روش، قطعه ژنی تکثیر یافته از نواحی متغیر، آنتی بادی های حاصل از لنفوسیت های نمونه مورد را با یکی از ژن های پروتئین های پوششی فاژ ( معمولا ژن III ) متصل نموده که نتیجه آن بیان شدن قطعه آنتی بادی نوترکیب مود نظر به همراه پروتئین پوششی در سطح فاژ می باشد.

9. قطعات متنوع آنتی بادی تولید شده توسط مهندسی ژنتیک

10. انواع تکثیر

11. mRNA به دست آمده از سلول های طحال یا لنفوسیت به دست آمده از خون محیطی برای ساخت کتابخانه scFv

12. ▪ ذره فاژی نوترکیب، پپتید ها را در بخشی از پروتئین های سطحی خود که مطابق با محل ورود قطعات تصادفی DNA در ژنوم آن است بیان می کند. ▪ حال اگر این فاژها را در معرض لیگاند مورد نظر قرار دهیم، فاژهایی که پپتید تمایل اتصال به لیگاند را نمایش می دهند، به لیگاند مربوطه متصل و بقیه حذف می گردند. ▪ تکرار این عملیات برای چنددور فاژی را در اختیار قرار می دهند که تمایل بالایی برای لیگاند مورد نظر دارند.

13. The phage display cycle

15. تولید آنتی بادی مونوکلونال

16. تکثیر فاژ نوترکیب در سلول میزبان

17. منابع

20. 18