1. Bacillus anthracis na ka

2. Pseudomonas, Bacillus Nozokomiálne nákazy Antrax a bioterorizmus
Mikroskopický preparát - podľa Grama - Ps. aeruginosa, Bacillus anthracis a Bacillus cereus,
podľa Wirtz Coonklina -B. anthracis
Kultivácia Ps. aeruginosa na KA a Endovejpôde,
B. anthracis a B. cereus na KA
Biochemické vlastnosti Ps. aeruginosa
Ascoliho termoprecipitačná reakcia
ATB terapia Ps. Aeruginosa, B. anthracis, B.cereus

3. Nozokomiálne nákazy
Nemocničná nákaza - infekcia, ktorá vznikla v súvislosti s pobytom v nemocnici alebo diagnostickým, terapeutickým či preventívnym zákrokom.Nemusí sa prejaviť pri hospitalizácii a nie každá infekcia, ktorá sa prejaví v nemocnici je NN
Faktory vzniku - vnímavosť(vek, sprevádzajúce ochorenie, chirurgické zákroky, terapia - ATB, imunosupresia, ožarovanie, neživý rezervoár - katetre)
Mikroorganizmy
Cesty prenosu - nepriamo (inhalácia, ingescia, inokulácia) , priamo (dotykom chorej kože alebo sliznice so zdravou)
Prevencia - organizačné opatrenia, stavebné úpravy, zásobovnie potravinami, ošetrovateľká technika, aseptické a antiseptické prístupy, upratovanie, dezinfekcia a sterilizácia, izolácia, monitorovanie, surveillance, úloha laboratória)
ATB terapia

4. ATB terapia u nozokomiálnych nákaz
Nadmerné podávanie - vznik rezistencie a multirezistencie (selekčný tlak a prenos rezistencie v nemocničnom prostredí), výskyt toxických vedľajších účinkov, ekonomická záťaž, likvidácia fyziologickej mikroflóry
Racionálne podávanie - zastavenie šírenia NN
Profylaxia zameraná na anerobné infekcie - perioperačná príprava pri GIT a gynekologických zákrokoch, pri inštrumentálnom vyšetrení u pacientov s bakteriúriou
ATB prehľady - monitorovanie stavu rezistencie
Reštriktívna politika - dočasný zákaz používanie niektorých ATB - zameraná na zastzavenie šírenia rezistencia
Rotácia atb - periodické zmeny aplikácie ATB - znižujú selekčný tlak
Kombinácia atb - likvidujú možné rezistentné mutanty, široký záber na viaceré mi druhy

5. Pseudomonas aeruginosa
Mikroskopický preparát - podľa Grama –
Ps. aeruginosa,: G- hrubá palička
Ps. aeruginosa na KA - mukózne šedavé kolónie s kovovým leskom a pigmentom s charakteristickou vôňou Produkcia púzdra a difuzibilných pigmentov - pyocyanin

6. Biochemické vlastnosti Ps.aeruginosa
minimálne nutričné nároky, termotolerantné 4*- 42* C, rezistencia na ATB and dezinfekčné látky Nefermentujúce – cytochromoxidáza – dif.dg. (COX test),
Hajnova pôda - bez zmeny - celá červená - len dôkaz pigmentu a vône.
Na priesvitných pôdach - bledých - zelenkavý pigment
Primárne oportúnne: faktory virulencie Pilli - adherencia
Polysacharidové púzdro – antifagocárne vlastnosti, upevnenie baktérie
Endotoxin – LPS sepsa
Exotoxin A – najdôležitejší, blokuje proteosyntézu eukaryotických buniek
Alkalická proteáza – deštrukcia tkaniva
Fosfolipáza C – rozkladá lipidy a lecitín, tkanivová deštrukcia,

7. Citlivosť na ATB u pseudomonád
Liečba - Frustrujúca – imunokompromitovaná obrana hostiteľa, typická ATB rezistencia indukcia ATB inaktivujúcich enzýmov prenos rezistencie prostredníctvom plazmidov Izolácia bez dôkazu ochorenia neindikuje terapeutickú intervenciu
Aminoglykozidy – neúčinné v mieste infekcie (kyslé prostredie v abscesoch) Kombinácia ATB – beta laktámové ( chránené) + aminoglykozidy, Meronem, Imipenem, Sulperazon, Cefoperazon
Prevencia Zábrana kontaminácie sterilných nástrojov a skríženej kontaminácie medzi pacientami. Dekontaminácia násadcov dýchacích prístrojov a prostredia - nozkomiálne kmene JIS a aro Širokospektrálne ATB používať veľmi indikovane – supresia normálnej flóry a prerastenie rezistentných pseudomonád

9. Anthrax a bioterorizmus
Veľmi virulentný (toxín)
Nákaza inhaláciou, ingesciou aj kontaktom - šírenie vzduchom - aerosol, bomby, vodou
Rezistentné na vonkajšie podmienky - široké teplotné rozhranie (14-42*C).
Spóry - prežívajú vysušenie

10. Mikroskopia
Bacillus anthracis - G+ hrubá palička , dlhé reťaze paličiek s cetrálne uloženými spórami vyplňujúcimi celý priemer baktérie - prejasnenenie (spóry).
V preparáte z tkaniva sú bez spór.
Bacillus cereus: G+ palička bez púzdra, pohyblivá
podľa Wirtz Coonklina (praktiká 4 LS) - dôkaz spór Bac.anthracis

11. Bacillus anthracis
Bacillus anthracis is an aerobic, gram-positive, spore-forming, nonmotile Bacillus species. The nonflagellated vegetative cell is large (1-8 µm (microns) long, µm wide). Spore size is approximately 1 µm. Spores grow readily on all ordinary laboratory media at 37°C.
Slide: MDH. Cattle outbreak, Northern Minnesota.

12. B. anthracis
Gram-positive, spore-forming, non-motile bacillus

13. Bacillus cereus-gram labilná palička

14. Wirtz Conklin farbenie spór
Diferenciačné farbenie na spóry
Sporoformné baktérie – červené
Spóry – zelené
Suspenzia sa usuší na vzduchu, zafixuje teplom a preleje 5% malachitovou zelenou. Zahrieva sa do výstupu pár 3-6 minút. Opláchne pod tečúcou vodou 0,5% vodný roztok safranínu sa použije na dofarbenie (30 sek.) Preparát sa opláchne tečúcou vodou, vysuší, mikroskopia pod imerziou

16. Kultivácia
B. anthracis na KA - aeróbna, fakult. anaeróbna palička,a t.: *C, malé šedavé adherujúce kolónie, paličky sa ukladajú paralelne a tak aj rastú - obraz caput medusae, kolónie s vlnovitými okrajmi. Opúzdrené kolónie sú jemné, neopúzdrené - hrubé, Staršie kolónie vyrastajúce v aeróbneom prostredí obsahujú spóry .- suchý vráskavý vzhľad. Rast na pôde s PNC - vo forme šnúry perál
B. cereus na KA - netvorí púzdro šedavé kolónie

17. Positive encapsulation test for Bacillus anthracis
This slide shows blood agar and bicarbonate agar plate cultures of Bacillus anthracis resulting in a positive encapsulation test for B. anthracis. The rough colonies are on blood agar and smooth colonies on bicarbonate agar.
Content Provider(s): CDC/Dr. James Feeley
Source Library: PHIL
Positive encapsulation test for Bacillus anthracis

18. Ascoliho termoprecipitačná reakcia
Dôkaz toxínu
Nástroje patogenity - púzdro a toxín - obidva majú antifagocytárne vlastnosti , toxín - toxický účinok, CNS, leu. Fagocytované spóry nie sú zničené
Toxín - 3 súčasti : EF - edematogénny faktor, LF - letálny faktor, protektívny antigén PA
EF+LF - nemajú toxické účinky
LF+PA - letálny, neprodukuje edém
EF+PA - len edém
EF+PA+LT - maximálna toxicita
PA - najimunogénnejší , aj sám
EF, LT samostatne nie sú imunogénne
EF+PA, EF+LT, LT+PA, EF+LT+PA - imunogénne

19. Anthrax: Cutaneous Vesicle Day 6 development Day 2 Day 4 Day 10
Eschar formation

20. Anthrax: Inhalational
Mediastinal widening
JAMA 1999;281:1735–1745

21. Mediastinal Widening and Pleural Effusion on Chest X-Ray in Inhalational Anthrax

22. Inhalational Anthrax Victim (view of chest cavity)
Heart
This slide shows the necrotic chest cavity of an inhalational anthrax victim.
Photo of Cavity of Inhalational Anthrax victim.
Photo provided by US Army Medical Research Institute of Infectious Disease (USAMRIID), Ft. Detrick, MD.
Lung

23. Brain of a person who died from inhalational anthrax
The Human Brain
Brain of a person who died from inhalational anthrax
Normal Brain
This slide compares a normal brain to the brain of a person with hemorrhagic meningitis who died from inhalational anthrax. Hemorrhagic meningitis occurs in one half of cases as a result of the seeding of the meninges.

24. Presumptive Identification
B. anthracis:
Presumptive Identification
Clinical specimen (blood, CSF, etc.)
Isolate on SBA
Colony morphology
Hemolysis
Motility
Spores
Gram stain
Malachite green
Gram stain
Capsule production