1. ... Why Just NMR? – Because there is hardly another technique that is so informative for many different types of applications, and because there is no other technique that provides so much fun.
Richard R. Ernst: Nobelova cena 1991: FT NMR

2. Mária Vilkováa, Ján Imricha, Miroslav Repčákb, Veronika Porackáb
STRATÉGIA HĽADANIA ŠTRUKTÚRY NEZNÁMEJ ZLÚČENINY POMOCOU NMR - príklad rastlinných metabolitov.
Mária Vilkováa, Ján Imricha, Miroslav Repčákb, Veronika Porackáb
aLaboratórium NMR spektroskopie, Ústav chémie, Prírodovedecká fakulta, Univerzita Pavla Jozefa Šafárika, Moyzesova 11, Košice
bKatedra botaniky, Ústav biologických a ekologických vied, Prírodovedecká fakulta, Univerzita Pavla Jozefa Šafárika, Moyzesova 11, Košice

3. NMR spektroskopia Varian VNMRS 600 NMR spektrometer:
gradientová sonda PFG OneNMR (dutina 5 mm)
1H NMR ( MHz), 13C NMR ( MHz)
interný štandard: tetrametylsilán (TMS, 0 ppm)
deuterované rozpúšťadla: metanol (CD3OD) alebo dimetylsulfoxid (DMSO)
chemické posuny -  stupnica [ppm]
interakčné konštanty - J [Hz]
protón-protón a protón-uhlík korelácie - gradientové selektívne homonukleárne a heteronukleárne experimenty s adiabatickými pulzmi
Rastliny boli vypestované v botanickej záhrade Ústavu biológie a ekológie PF UPJŠ. Rastliny boli spracované a metanolový extrakt bol rozdelený semipreparatívnou HPLC. Odparky jednotlivých frakcií boli následne analyzované pomocou NMR spektroskopie na spektrometri VNMRS 600.
Sonda OneNMR.
Vzorka v NMR kyvete
v rotore (vpravo).
VNMRS 600 NMR spektrometer
(vpredu konzola a RF inteface,
vzadu magnet).
Prierez magnetom.

4. 1H a 13C NMR spektrum VZORKA 1: zmes rastlinných metabolitov
Obrázok 1. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) spektrum (8,50 – 3,00 ppm) zmesi metabolitov.
Obrázok C NMR (150 MHz, CD3OD) spektrum (175,0 – 40,0 ppm) zmesi metabolitov.

5. 1H a 13C NMR spektrum VZORKA 1: zmes rastlinných metabolitov
Obrázok C NMR (150 MHz, CD3OD) spektrum (175,0 – 40,0 ppm) vzorky 1.
Obrázok 1. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) spektrum (8,50 – 3,00 ppm) vzorky 1.
Obrázok 3. Spektrum DEPT (150 MHz, CD3OD) spektrum (175,0 – 40,0 ppm) vzorky 1.

6. [13C,1H]-HSQC (1H) (13C) [ppm] [ppm] 8.02 141.1 7.86 146.1
Obrázok 4. HSQC (CD3OD) spektrum zmesi
metabolitov (vpravo oblasť aromatických protónov a uhlíkov).

7. [13C,1H]-HSQC (1H) (13C) [ppm] [ppm] 4.96 102.5 4.94 103.6
Obrázok 4. HSQC (CD3OD) spektrum zmesi
metabolitov (vpravo oblasť anomérnych protónov a uhlíkov).

8. [13C,1H]-HSQC (1H) (13C) [ppm] [ppm] 3.90 62.6 3.69 62.5 62.4
62.4
78.1
71.2
Obrázok 4. HSQC (CD3OD) spektrum zmesi
metabolitov (vpravo oblasť protónov a uhlíkov patriacich cukorným zložkám).

9. [1H,1H]-COSY
Obrázok 5. COSY spektrum (CD3OD, 8,50 – 3,00 ppm) zmesi metabolitov (vpravo oblasť aromatických protónov a protónov na násobných väzbách).

10. [13C,1H]-HMBC
163.1
7.67 (132.7)
138.3
7.24 (138.8)
132.7
6.79 (102.5)
119.1
108.6
6.56 (108.6)
102.5
5.84 (119.3)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov (vpravo prenosy magnetizácie z protónov na uhlíky).

11. [13C,1H]-HMBC
163.1
7.67 (132.7)
138.3 (7.24)
7.24 (138.8)
132.7 (7.67)
6.79 (102.5)
119.1
108.6 (6.56)
6.56 (108.6)
102.5 (6.79)
5.84 (119.3) (C=O)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov (vpravo prenosy magnetizácie z protónov na uhlíky).

12. [13C,1H]-HMBC
163.1
7.67 (132.7)
138.3 (7.24)
7.24 (138.8)
132.7 (7.67)
6.79 (102.5)
119.1
108.6 (6.56)
6.56 (108.6)
102.5 (6.79)
5.84 (119.3) (C=O)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov (vpravo prenosy magnetizácie z protónov na uhlíky).

13. [13C,1H]-HMBC
163.1
7.67 (132.7)
138.3 (7.24)
7.24 (138.8)
132.7 (7.67)
6.79 (102.5)
119.1
108.6 (6.56)
6.56 (108.6)
102.5 (6.79)
5.84 (119.3) (C=O)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov.

14. [13C,1H]-HMBC
171.9
8.02 (141.1)
129.9
117.0
164.0
7.55 (132.7)
141.1
164.3
6.85 (102.7)
118.1
109.9
6.64 (109.9)
102.7
6.40 (116.5)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov (vpravo prenosy magnetizácie z protónov na uhlíky).

15. [13C,1H]-HMBC
162.8
7.86 (146.1)
119.6
116.5 (sl.)
149.7
7.22 (114.4)
116.5
7.08 (119.6)
144.4
6.29 (114.6)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov (vpravo prenosy magnetizácie z protónov na uhlíky).

16. [13C,1H]-HMBC
162.8
7.86 (146.1)
119.6
116.5 (sl.)
149.7
7.22 (114.4)
116.5
7.08 (119.6)
144.4
6.29 (114.6)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov (vpravo prenosy magnetizácie z protónov na uhlíky).

17. [13C,1H]-HMBC
162.8
7.86 (146.1)
119.6
116.5 (sl.)
149.7
7.22 (114.4)
116.5
7.08 (119.6)
144.4
6.29 (114.6)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov (vpravo prenosy magnetizácie z protónov na uhlíky).

18. [13C,1H]-HMBC
162.8
7.86 (146.1)
119.6
116.5 (sl.)
149.7
7.22 (114.4)
116.5
7.08 (119.6)
144.4
6.29 (114.6)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov.

19. [13C,1H]-HMBC Anomérne protóny 4.96 (102.5) 159.0 4.94 (103.6) 158.2
4.96 (102.5)
4.94 (103.6)
4.91 (102.8)
Metylové skupiny
3.80 (56.0)
3.71 (56.2)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov.

20. [13C,1H]-HMBC Anomérne protóny 4.96 (102.5) 159.0 4.94 (103.6) 158.2
4.96 (102.5)
4.94 (103.6)
4.91 (102.8)
Metylové skupiny
3.80 (56.0)
3.71 (56.2)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov.

21. [13C,1H]-HMBC Anomérne protóny 4.96 (102.5) 159.0 4.94 (103.6) 158.2
4.96 (102.5)
4.94 (103.6)
4.91 (102.8)
Metylové skupiny
3.80 (56.0)
3.71 (56.2)
Obrázok 6. HMBC spektrum (CD3OD) zmesi metabolitov.

22. [13C,1H]-HMBC Anomérne protóny 4.96 (102.5) 159.0 4.94 (103.6) 158.2
4.96 (102.5)
4.94 (103.6)
4.91 (102.8)
Metylové skupiny
3.80 (56.0)
3.71 (56.2)

23. POĎAKOVANIE
Doc. RNDr. Ján Imrich, CSc. Ing. Jan Pelnař, CSc. Mgr. Branislav Horváth, PhD. RNDr. Marianna Prokaiová Prof. RNDr. Miroslav Repčák, DrSc. RNDr. Veronika Poracká

24. ĎAKUJEM ZA POZORNOSŤ!