2. Corynebacterium

3. خصوصیات کلی جنس کورینه باکتریوم
باسیل های گرم مثبت چماق مانند، دارای شکل نامنظم مانند حروف چینی ،فاقد اسپور ،غیر اسید فست با محتوای G+C بالا هستند.
دیواره سلولی متشکل از آرابینوز،گالاکتوز و مزو دی پیملیک اسید و در بعضی گونه ها اسید های چرب با زنجیره بلند بنام اسید مایکولیک است
گرانولهای متاکروماتیک باکتری با رنگ آمیزی متیلن بلو قابل مشاهده است.

4. خصوصیات متمایزکننده گروهCMN
Corynebacterium
Mycobacterium
Nocardia 

5. خصوصیات کلی جنس کورینه باکتریوم
غیر متحرک ، کاتالاز(+)، بی هوازی اختیاری هستند.
کربوهیدراتها را تخمیر کرده واسید لاکتیک تولید می کنند.
بیشتر گونه ها بروی محیط های ساده رشد می کنند. برای رشد سویه های لیپوفیلیک باید به محیط کشت لیپید اضافه نمود.
اغلب عضوی از فلور طبیعی پوست،دستگاه های تنفس فوقانی، گوارش، ادراری و تناسلی انسان و حیوان هستند.

7. فاکتور های ویرولانس گونه های مختلف
کورینه باکتریوم

8. خصوصیات کورینه باکتریوم دیفتریه
1- باسیل گرم مثبت، چماقی شکل و به شکل حروف چینی دیده میشود. ظاهری دندانه دار و تسبیح مانند (گرانول متاکروماتیک) دارد.
2- بدون حرکت،بدون اسپور،غیر اسید فست و بدون کپسول است.
3- هوازی و یا بی هوازی اختیاری است و در 37 درجه سانتی گراد (حداقل 20 و حد اکثر 40 درجه ) رشد میکند.
4- در محیط بلاد اگار بعد یک روز انکوباسیون کلنی های کوچک 1-3 میلیمتری، دانه دار ، خاکستری و بعضا با حاشیه باریکی از همولیز ایجاد می کند.

10. خصوصیات کشت کورینه باکتریوم دیفتریه
5- برای جلوگیری از رشد استرپتوکوک ها و پنوموکوک از محیط های لوفلر و تلوریت دار استفاده می شود.
- در محیط لفلر کلنی های کوچک ،دانه دار،خاکستری با لبه نا منظم ایجاد میکند.
- در محیط تلوریت دار( محیط های تینسدال و اگار سیستئین-تلوریت) بعد از ساعت انکوباسیون، کلنی خاکستری مایل به سیاه ایجاد کرده ، تلوریت پتاسیم را در درون سلول احیاء میکند.
6- توکسین دیفتری توسط فاژ لیزوژنیک منتقل میشود
7- کربوهیدراتها را تخمیر کرده کاتالاز (+) است.

12. خصوصیات نژاد های توکسیژنیک در محیط تلوریت پتاسیم
1- کلنی نوع گراویس Gravis :
خاکستری ، بزرگ ، نامنظم ، شیار دار و بدون همولیز
2- کلنی نوع میتیس Mitis :
سیاه ، کوچک ، شفاف ، محدب و همولیز دار
3- کلنی نوع اینتر مدیوس Intermedius :
کوچک ، بدون همولیز و حد واسط بین دو نوع کلنی بالا
- تیپ کلنی با با شکل اختصاصی بیماری مرتبط نیست ولی یر اساس مطالعات انجام شده درصد سویه های حامل ژن توکسین در میان تیپ ها متفاوت است

13. خصوصیات نژاد های توکسیژنیک در محیط مایع
1- Gravis :
در محیط مایع به صورت ورقه ورقه نازک رشد میکند.
2- Mitis:
به صورت انتشار یکنواخت رشد میکند.
3-: Intermedius
به صورت دانه های ته نشین شده دیده میشود.

14. اپیدمیولوژی کورینه باکتریوم دیفتریه
اپیدمیولوژی کورینه باکتریوم دیفتریه
8- انسان تنها میزبان آن است.
9- از طریق قطرک های تنفسی با پوست آلوده منتقل میشود.
10- در مناطق اندمیک در گلو و بینی ناقلین سالم حمل میشود.
11- نسبت به خشکی مقاوم است. چندین هفته در گرد و غبار و مواد آلوده باقی میماند

15. بیماری زایی کورینه باکتریوم دیفتریه
اگزوتوکسین نقش اساسی دارد ولی خاصیت تهاجمی باکتری نیز ضروری است.
DNA توکسین دیفتری قسمتی از ماده ژنتیکی یک باکتریوفاژ لیزوژنیک (فاژ بتا) است.(ژن Tox)
در صورتیکه فاژ در چرخه لیزوژنی باشد یا در کورینه باکتریوم در حالت کمون باشد ، ژن Tox میتواند بیان شود.
بیان ژن فاژی توکسین در غلظت های پایین آهن (حداکثر 0.14 میکروگرم) انجام میشود ( اغلب در مرحله سکون و یا مرگ اولیه باکتری)

16. ژن tox دیفتری در باکتریوفاژ و پروفاژ

17. بیماری زایی کورینه باکتریوم دیفتریه
باکتری توسط سه نوع پیلی به نام های SpaA, SpaD, و SpaH که بوسیله سه دسته ژن کد میشوند به سلول های گلو متصل میشود ولی در خصوص فعالیت این پیلی ها اطلاعات کمی موجود می باشد.
توکسین از یک پلی پپتید حساس به حرارت (62000 دالتون) تشکیل شده است.
توکسین دیفتری با مهار ADP ریبوزیلاسیون عامل EF-2 از سنتز پروتئین جلوگیری میکند.
برخی محققین عقیده دارند توکسین دیفتری کروموزوم های سلول های هدف انسانی که با توکسین مواجه میشوند ، کاهش می یابد.
توکسین دیفتری به قلب،کلیه ها و اعصاب حمله می کند.

18. ساختمان مولکولی توکسین دیفتری
Catalytic Region
Receptor-Binding Region
Translocation Region
A Subunit
B Subunit

19. مکانیسم توکسین دیفتریq1
زیر واحد B توکسین واسطه اتصال توکسین به گیرنده های گلیکوپروتئینی غشای سلولهای یوکاریوتی بخصوص سلولهای قلبی و عصبی است.(فاکتور رشد اپیدرمی متصل به هپارین)
زیر واحد A اندوسیتوز شده و بعد از ورود به سلول واکوئل فاگوسیتی را ترک کرده و EF-2 (آنزیم ترانسلوکاز بوده و حاوی یک آمینواسید حاصل از هیستیدین بنام دیفتامید است) را غیر فعال می کند.
زیر واحد A فعالیت آنزیمی دارد و نیکوتیامید را از نیکوتینامید آدنین دی نوکلئوتید NADجدا کرده و باقیمانده ADP-ریبوز را به دیفتامید EF-2 متصل می کند. اتصال ADP-Rباعث غیر فعال شدن EF-2 میشود.

20. مکانیسم اثر توکسین دیفتری

21. مکانیسم فعالیت توکسین دیفتری

22. Heparin-binding epidermal growth factor on heart & nerve surfaces

23. بیماری زایی کورینه باکتریوم دیفتریه
در آزمایشگاه تولید توکسین به غلظت یون آهن بستگی دارد. حداکثر فعالیت در 0.14 میکروگرم آهن بوده و در میکروگرم فعالیت متوقف میشود.
فشار اسمزی، غلظت اسید امینه ،Ph ،وجود کربن و ازت نیز مهم هستند.
علت متوقف شدن در 0.15 میکروگرم آهن ، فاکتور مهار کننده توکسین دیفتری ( DTxR) است که توسط کروموزوم کدمیشود. DTxR در غلظت 0.15 میکروگرم آهن فعال شده به اپراتور ژن توکسین متصل شده و باعث توقف سنتز توکسین میشود.

24. بیماری زایی کورینه باکتریوم دیفتریه
پاسخ میزبان چیست ؟
1- التهاب در گلو که با غشای کاذب همراه است.(غشای کاذب از باکتری ،لنفوسیت ،پلاسما ، فیبرین و سلولهای مرده تشکیل شده است.)
2- تولید آنتی بادی
آزمایش Schick وضعیت ایمنی شخص را مشخص میکند.

25. Immune Status to C. diphtheriae and Sensitivity to Diphtheria Toxoid
تست پوستی Schick
TOXIN
TOXOID
Immune Status to C. diphtheriae and Sensitivity to Diphtheria Toxoid

26. یافته های بالینی و عوارض بیماری دیفتری
یافته های بالینی : غشای کاذب ، تب ، گلو درد ، آدنو پاتی گردنی
عوارض مهم :
انسداد راه هوایی در اثر وسعت غشای کاذب به حنجره و نای
میو کاردیت و کولاپس گردش خون (50% علت مرگ)
فلج عصب راجعه حنجره
دیفتری پوستی : فقط ضایعات زخمی ایجاد کرده و علائم سیستمیک ایجاد نمیکند.
سویه های غیر توکسین زا باعث سپتی سمی ، اندوکاردیت ، استئو میلیت و آبسه میشوند.

28. تشخیص آزمایشگاهی کورینه باکتریوم دیفتریه
نمونه : سواب های گلو ،حفره بینی ،حنجره و پوست
رنگ آمیزی نمونه: با رنگهای البرت ، نایسر، متیلن بلو و گرم
کشت : در محیط های کشت لوفلر (12-18 ساعت بعد ساب کالچر میشود) ، تلوریت پتاسیم و بلاد اگار
تشخیص توکسین زائی :
1- تست خنثی سازی با استفاده از خوکچه هندی و بصورت زیر جلدی
2-تست ELEK( یک تست ایمنودیفیوژن) – نوار پرسپیتاسیون بین کاغذ صافی اغشته به آنتی توکسین و توکسین موجود در کشت خطی کلنی مشکوک بعد از 4 ساعت گرمخانه گذاری ظاهر میشود.
3- خنثی سازی درکشت سلولی با استفاده از آنتی توکسین اختصاصی
4- تعیین مستقیم ژن tox درنمونه های کلینیکی توسط PCR

30. درمان و پیشگیری دیفتری درمان : 1- تجویز آنتی توکسین بطور اورژانسی
درمان و پیشگیری دیفتری
درمان :
1- تجویز آنتی توکسین بطور اورژانسی
2- تجویز پنی سیلین G و اریترومایسین
پیشگیری :
1- واکسیناسیون با توکسوئید دیفتری (که با مجاورت سوسپانسیون باکتری با 0.3% فرمالین تهیه شده و توسط ئیدروکسید الومینیم جذب سطحی گردیده است) انجام می شود ( واکسن سه گانه )
- واکسیناسیون در 5 دوز 2،4،6و 15 ماه،6-4 سال انجام میشود
واکسیناسیون از انتقال باکتری در نازوفارنکس جلوگیری نمی کند.

31. Corynebacterium jeikeium (group JK) (Lipophilic)
Septicemia ,pneumoniae, endocarditis ,wound infections ,foreign body infection
بخشی از فلور طبیعی پوست در زیر بغل ، مقعد و کشانه ران است(در 40% افراد).
در بیماران دارای نقص ایمنی ، دارای کاتتروریدی و یا مبتلا به لوسمی یا نوتروپنی بستری در بیمارستان که انتی بیوتیک وسیع الطیف استفاده می کنند باعث عفونت میشود.
نسبت به آنتی بیوتیک ها بسیار مقاوم است.
ونکومایسین داروی انتخابی است . داروی در رده دوم سیپروفلوکساسین است.

32. C.urealyticum (group DZ) (Lipophilic)
UTI , struvite calculi, Septicemia , endocarditis ,wound infections
معمولا در افراد سالم ایزوله نمی گردد.
عامل UTI می باشد .تولید اوره آز قوی کرده که با قلیایی کردن ادرار در تشکیل سنگ ادراری struvite calculi
نقش دارد.
فاکتور های خطر در ابتلا به عفونت نقص ایمنی، اختلالات زمینه ای دستگاه ادراری،عمل جراحی قبلی در دستگاه ادراری وسابقه استفاده از آنتی بیوتیک است
نسبت به بسیاری از آنتی بیوتیک ها مقاوم است

33. Corynebacterium minutissimum (Lipophilic-fermentative)
Wound inf. Respiratory Tract inf. Erythrasma
اریتراسما یک عفونت سطحی در در پوست کشانه ران و زیر بغل است که منشا چند میکروبی دارد.
در محل عفونت قرمزی و پوسته شبیه روغن و براق مشاهده میشود.
نمونه برداری توسط نوار سلوفان انجام شده و بعدازقرار دادن روی لام رنگ آمیز گرم،متیلن بلو ویا گیمسا میشود
باکتری رنگ پورفیرین تولید می کند لذا لزیون های اریتراسما در لبه ها برنگ قرمز مرجانی فلورسنس هستند.

34. Other Non-Lipophilic & fermentative Corynebacterium species
C.ulcerans
Respiratory diphteria
-می تواند ژن tox را حمل کند.
- بیماری مشابه دیفتری ایجاد می کند.
C. puseudotuberculosis
Lymphadenitis, abscesses
- می تواند ژن tox را حمل کند
- بندرت در عفونت انسان نقش دارد

35. Other Non-Lipophilic & fermentative Corynebacterium species
C.amycolatum
Wound inf. Septicemia , UTI, Respiratory Tract inf.
- فقط فلور طبیعی سطح پوست است.
از نمونه های بالینی بسیار ایزوله میشود ولی با گونه های دیگر اشتباه می شود.
پاتوژن فرصت طلب است.
نسیت به بسیاری از آنتی بیوتیک ها مقاوم است.
C. striatum
Wound infections, Respiratory tract infections, foreign body infection

36. Other Non-Lipophilic & Non-fermentative Corynebacterium species
C. glucuronolyticum
UTI (men)
اوراز مثبت است.
C.auris
Otitis (in children)
C.psedodiphtericum
Respiratory Tract inf.

37. Other Corynebacterium species
C.macginleyi
Eye infections
C.riegelli
GTI (female)

38. Other coryneform G(+) bacilli
Arcanobacterium:
Pharyngitis,sellulitis, wound inf. Absess, septisemia,endocarditis
Brevibacterium:
Septisemia, osteomyelitis, foreign body infection
Oerskovia:
septisemia, endocarditis, meningitis, foreign body infection
Turicella:
Ear inf.

39. Listeria monocytogenes
باسیل گرم مثبت،کوچک ،دوتایی و یا تک تک و به طول میکرومتر و عرض میکرومتر است . انتهای برجسته دارد و بدون اسپور است.
بی هوازی اختیاری است .
در 22 درجه با چهار تاژک حرکت میکند ( به حالت ملق زدن)ولی در 37 درجه بی حرکت و یا کم حرکت است.
در محیط Mueller – Hinton رشد میکند.
در بلاد اگار در زیر و اطراف کلنی همولیز ایجاد میکند و در 24 ساعت اول کلنی اب مانند و بعد مات میشود.

41. Listeria monocytogenes
در صورتیکه قبل از کشت در 4 درجه نگهداری شود ، بهتر رشد میکند. (Cold enrichment)
کاتالاز(+)،از کربوهیدراتها اسید تولید میکند، گازتولید نمیکند ، تست کامپ(+)،هیدرولیز هیپورات(+)،رشد در6.5% نمک(+)، هیدرولیز اسکولین(+)و حرکت چتری در لوله ازمایش (+)
تعیین سروتایپ بر پایه انتی ژن های سوماتیک و فلاژلی است.
1/2a, 1/2b, 1/2c, 3a, 3b, 3c, 4a, 4b, 4c and 4d

42. Listeria monocytogenes
پاتوژنز
بوسیله پنیر و سبزیجات الوده به بدن وارد میشود.
داخل سلولهای اپیتلیال ، ماکروفاژها و سلولهای فیبروبلاست تکثیر می یابد.(داخل سلولی اختیاری)
عفونت درانتروسیت ها و یا سلولهای M پلاک پیر اغازمی شود.
7 نوع پروتئین اینتر نالین غنی از لوسین (InlA,InlB,InlC) در اتصال به گیرنده گلیکوپروتئینی سلول میزبان نقش دارد
پروتئین P60 فاگوسیت شدن بدرون سلول پستانداران را القا میکند
لیستریولیزین O و دو انزیم فسفولیپازC در ازاد شدن از غشاء فاگولیزوزوم و ورود به سیتوزول نقش دارند
تکثیر باکتری در سیتوزول انجام میشود.
همولیزین ها و پروتئین های موثر در حرکت وابسته به اکتین (ActA)از عوامل بیماریزا بشمار می اید.( حرکت بین سلولی با پای کاذب)
بوسیله حرکت داخل سلولی از عمل پاکسازی وابسته به انتی بادی می گریزد.
توسط ماکروفاژ به کبد وطحال رسیده عفونت منتشره ایجاد می کند.
آهن یک عامل مهم در تهاجم باکتری است.

43. Methods That Circumvent Phagocytic Killing

44. Intracellular Survival & Replication of Listeria
Listeriolysin O?
Macrophage
Phagocytosis
Intracellular Replication
Actin Filaments

45. Listeria monocytogenes
اپیدمیولوژی و روش های انتقال بیماری
از خاک،آب،سبزیجات ،انواع حیوان و انسان ایزوله میشود.
با مصرف پنیر نرم،شیر، گوشت بوقلمون ،سبزیجات خام منتقل شده و از طریق جفت مادر به جنین میرسد.
در شرایط اسیدی و دمای سرد رشد میکند.
اپیدمی در ماه های گرم بیشتر است.
نوزادان، زنان باردار، مسن ها و افراد با نقص ایمنی سلولی در معرض بیماری هستند.
عفونت اسپورادیک است، در تابستان بیشتر دیده میشود
میزان مرگ ومیر در بیماری های علامت دار بالاتر از مرگ و میر تقریبا همه بیماریهای منتقله از مواد غذایی است.30-20%
تقریبا 5-1 % افراد سالم ناقل هستند

46. Epidemiology of Listeria Infections
Natural Reservoirs
Common Routes for Human Exposure
Population at Greatest Risk

47. Listeria monocytogenes
یافته های بالینی
لیستریور پری ناتال عفونتی داخل رحمی است.
(Infantiseptica - granulomatis)
شروع زودرس باعث سپسیس داخل رحمی و مرگ قبل از زایمان میشود. در ارگانهای بدن گرانولوم ایجاد میکند .مرگ و میر بالاست
شروع دیر 2-3 هفته بعد از تولد باعث سندرم مننژیت و یا مننگوانسفالیت و سپتی سمی میشودIVb)).
در بزرگسالان اغلب بدون علامت و یا شبیه آنفلوانزاست
مننگو انسفالیت و باکتریمی در بزرگسالان، مننژیت بالغین (در مبتلایان به سرطان، بارداران، دیابتی ها و بیماران با سرکوب سیستم ایمنی)

48. Listeria monocytogenes
تشخیص آزمایشگاهی
غلظت در مایع مغزی نخاعی کم است( 104 عدد در میلیلیتر) و در رنگ آمیزی گرم دیده نمی شود. درصورت دیده شدن به شکل کوکوباسیل های گرم(+) داخل و خارج سلولی دیده میشود.
بعد از 2-1 روز انکوباسیون در بلاد اگار همولیز بتا ولی ضعیف ایجاد میکند.
در محیط های انتخابی مانند Oxoid chromogenic Listeria agar و Listeria selective agarرشد میکند
Cold Enrichment مورد استفاده قرار میگیرد.
کاتالاز(+)، کمپ (+)، هیدرولیز هیپورات (+)، رشد در 6.5% نمک (+)، حرکت چتری (+)، هیدرولیز اسکولین (+)
Chromogenic Listeria Agar
ListeriaSelective medium

49. تشخیص آزمایشگاهی آزمون های سرولوژِی (13 سروواربخصوص 1/2a,1/2b,4b)
پروفایل های انزیمی(الکتروفورز انزیمی چند کانونی(MLEE)
انالیز ژنومی(PFGE,RIBOTYPING , RAPD)بخصوص جهت سرووار1/2a
مقاومت به فلزات ( ارسنیک و کادمیموم) جهت تشخیص سویه های مختلف یک سرووار

50. Listeria monocytogenes
درمان
پنی سیلین ، آمپی سیلین و جنتامایسین، اریترومایسین
لیستریا به طور طبیعی به سفالوسپورین ها مقاوم است.
مقاومت به امینوگلیکوزیدها و تتراسیکلین توسط پلاسمید وترانسپوزون کد میشود. ( ژنهای مقاومت از انتروکوک کسب میشود)

51. Erysipelothrix rhusiopathiae
- باسیل گرم مثبت باریک ( میکرومتر و عرض میکرومتر)
بدون حرکت
در رنگ امیزی گرم گاهی منفی دیده میشود.
- به صورت منفرد یا زنجیرهای کوتاه نامنظم و رشته ای شاخه دار دیده میشود. بعضا پلئومورفیسم دارد
بی هوازی اختیاری (تمایل به میکروآئروفیل)
فاقد اسپور

52. Erysipelothrix rhusiopathiae
کشت: در بلاد اگار بعد از 2-3 روز انکوباسیون کلنی کوچک ، الفا همولیتیک و خاکستری تولید می کند.
-به اشکال کلنی بزرگ و دانه دار(R)و یا کلنی کوچک،صا ف (S) رشد میکند.
-کاتالاز(-)، اکسیداز(-)، ایندول(-) ، سولفید هیدروژن(+) ، تخمیر کننده ضعیف
-از لاکتوباسیل ها بوسیله توانایی تولید H2S درTSI تفریق داده میشود

53. Erysipelothrix rhusiopathiae
احتمالا فاکتور های بیماریزا در انسان هیالورونیداز، نورامینیداز می باشد
در لوزه و یا دستگاه گوارش پرندگان، ماهی، خوک، بوقلمون و پستانداران وحشی و اهلی ایزوله میشود.
افراد دارای مشاغل مرتبط با حیوانات در معرض خطر ابتلا می باشند.
از طریق مواد غذایی حیوانی، خاک الوده ، افراد دچار عفونت جلدی میشوند.

54. Erysipelothrix rhusiopathiae
اشکال بیماری:
1- عفونت موضعی پوست ( اریزپلوتریکس)
2- عفونت منتشر پوستی (نادر، کشت خون منفی)
3- سپتی سمی(نادر- اغلب همراه اندوکاردیت تحت حاد)
تشخیص آزمایشگاهی:
اسمیر: رنگ آمیزی گرم (مثبت و گاهی گرم منفی)
کشت : بروی بلاد اگار، 3-2 روز انکوباسیون (همو لیزالفا وکلنی کوچک)
تستهای ازمایشگاهی: عدم حرکت و عدم تولید کاتالاز (تفریق از لیستریا)
نسبت به پنی سیلین و سفالوسپورین حساس ولی نسبت به آمینوگلیکوزیدها، سولفنامیدها و وانکومایسین مقاوم است.

55. Erysipeloid (انگشت نهنگ و یا شیر دریائی
- دوره کمون: 4-1 روز
- ضایعات روی انگشت یا دست ، برنگ بنفش با لبه های برامده. به کندی انتشار میابد، درد، خارش ، حس سوختگی دارد
- تورم وجود دارد ولی چرک موجود نیست. (افتراق از اریزپلاس)
- سپتی سمی و اندوکاردیت نیز ایجاد میکند.

56. Rodococcus equi
facultative anaerobe, intracellular, nonmotile, non–spore-forming, gram-positive coccobacillus (an organism that has the ability to exist as a coccus or bacillus or intermediate form).
form a red (salmon-colored) pigment
can be weakly acid-fast and bears a similarity to diphtheroids.
was previously called Corynebacterium equi and is currently grouped with the aerobic actinomycetes.
Of the 40 genera in the actinomycetes group, the Rhodococcus genus is placed among the nocardioform bacteria, along with the genera Mycobacterium, Nocardia, Gordonia, Tsukamurella, and Corynebacterium.
R equi infection is associated with significant mortality. The organism can be difficult to eradicate, making treatment challenging at times.

57. Rodococcus equi

58. Rodococcus equi
Virulence factors: a 15- to 17-kd virulence-associated protein antigen (VapA), 20-kd virulence-associated protein antigen (VapB)
Diseases :Necrotizing pneumonia is the most common manifestation of R equi infection . Extrapulmonary R equi infections have included wound infection, subcutaneous abscess, brain abscess, thyroid abscess, retroperitoneal abscess, peritonitis, meningitis, pericarditis, osteomyelitis, endophthalmitis, lymphadenitis, lymphangitis, septic arthritis, osteitis, bloody diarrhea, and fever of unknown origin.
Bacteremia and dissemination of infection follow from the primary infection site, which is usually the lung.

59. R.equi Diagnosis: CBC count, Blood cultures
The distinctive salmon-colored colonies of R equi may not appear for 4-7 days.
Any growth of diphtheroids should be viewed with suspicion. Consider blood cultures also in localized infections.
In patients infected with HIV, the rate of positive blood culture results is %.
In immunocompetent patients, blood cultures yield positive results in about 30% of patients.

60. R.equi
Sputum Gram stain and culture: In patients infected with HIV who have pulmonary involvement, the rate of positive sputum culture results may be %. A positive sputum culture result may be found in only about 35% of immunocompetent patients.
Stool culture: Obtain a stool culture in a patient infected with HIV who has diarrhea.
Treatment : may require prolonged combination antibiotic therapy, sometimes in combination with surgical therapy.

61. Arcanobacterium species
A. haemolyticum has been expanded to include sepsis and osteomyelitis.
Gram-positive, facultative anaerobic catalase negative rods (but transition to the coccal shape occurs as the organism grows) with arrangements described as matchbox or Chinese letters arrangements.
Growth is enhanced in blood and by carbon dioxide
Hemolysis is detected on human blood agar plates, and routine plating of specimens suspected of containing A. haemolyticum on human blood agar is suggested to distinguish it from Streptococcus pyogenes as A. haemolyticum can easily be confused with this organism. The most reliable way to distinguish it from S. pyogenes is to perform a Gram Stain.

62. Arcanobacterium species
A. haemolyticum often occurs in polymicrobic infections together with typical respiratory pathogens such as streptococci. The isolation of classical pathogens from specimens that also contain A. haemolyticum might be in part responsible for the tendency to miss the organism.
The organism is known to produce uncharacterized hemolytic agent(s), a neuraminidase and a phospholipase D (PLD) acting preferentially on sphingomyelin. PLD is known to result in tissue damage, but the role in disease of the cytotoxic effect caused by this extracellular toxin is not established
A. hæmolyticum isolated from humans is susceptible to erythromycin (proposed as the first line drug), clindamycin, gentamicin, and cephalosporins.

63. Arcanobacterium species
Arcanobacterium pyogenes (formerly Corynebacterium or Actinomyces pyogenes)
is a Gram-positive rod which may show branching.
Colonies on blood agar produce sharp zones of β-haemolysis after 48 hours incubation.
A. pyogenes is facultatively anaerobic, non-motile, and catalase-negative.
Differentiation between A. pyogenes and A. haemolyticum may prove difficult but they may be distinguished by fermentation of α-mannose, pyrazinamidase and gelatin tests.

64. Arcanobacterium species
Arcanobacterium bernardiae formerly (Actinomyces bernardiae)
exhibits variable haemolysis

65. Gardnerella vaginalis
General Characteristics
short, pleomorphic gram-positive
rod or coccobacillus that often stains gram-variable or gramnegative.
G vaginalis has a gram-positive type of cell wall;
however, the peptidoglycan layer is thinner than that found in other gram-positive bacteria, such as Corynebacterium and Lactobacillus. G vaginalis is the only species in the genus and
was first described in It is found as normal biota in the human urogenital tract.

66. Gardnerella vaginalis
primarily known for its association with bacterial vaginosis (BV) in humans. For years G vaginalis
was thought to be the only cause of BV.
However, the organism can be isolated from as many as 40% of women without
BV is a polymicrobial disease : G vaginalis , Prevotella spp. , Peptostreptococcus spp. , Porphyromonas spp., Mobiluncus spp., Atopobium vaginae, and Mycoplasma hominis
it may also be detected in other samples from blood, urine, and pharynx. G. vaginalis is sexually transmitted.

67. Diagnosis of bacterial vaginosis
Microscopy:
often appears as a pleomorphic, gram-variable coccobacillus or short rod.
can be visualized in wet mounts of vaginal fluid when BV is suspected.
The observation of "clue cells," large squamous epithelial cells with grampositive and gram-variable bacilli and coccobacilli clustered on the edges, aids the diagnosis of BV, particularly if Lactobacillus rods are absent in the wet mount.

68. Bacterial vaginosis

69. Clue cell

70. Nugnet scoring system
The Nugent scoring system for Gram-stained vaginal smears is a more accurate means of diagnosing BV than cultures Stained smears are examined and scored for the presence of Lactobacillus, Gardnerella, and Mobiluncus spp. morpho types

71. Gardnerella vaginalis
Culture
It often takes longer than 24 hours to develop visible colonies, and G vaginalis grows best in 5‘% to 7% CO2 at a temperature of 35° to 37° C.
G vaginalis grows on SBA as pinpoint, non hemolytic colonies.
It will also grow on chocolate agar
the medium of choice for G vaginalis, is human blood bilayer Tween (HBT) agar. When cultured on human blood, colonies are ẞ-hemolytic, small, gray, and opaque. G vaginalis will also produce ẞ-hemolytic colonies on media made with rabbit blood.

72. Gardnerella vaginalis
Identification.
G vaginalis is catalase-negative, oxidase-negative,
hippurate hydrolysis positive.
~-Hemolytic colonies on HBT agar
Some laboratories utilize 16S rRNA gene sequencing to definitively identify G.vaginalis.