1. RT-PCR 扬州大学 生物科学与技术学院

2. 背景介绍 DNA 存在于细胞核中并编码了基因 转录 : 双链 DNA 解链后利用其中一条链（编 码链）合成信使 RNA （ mRNA ） mRNA 从细胞核转移到细胞质中 mRNA 结合上核糖体开始翻译成蛋白质 蛋白执行基因的功能

3. 从 DNA 转录成 mRNA

4. 转录，复制和翻译

5. 扬州大学生物科学与技术学院 生物化学精品课程 原理 利用逆转录酶能将 RNA 逆转录成 DNA 的特 性，通过合适的引物，将细胞内的 RNA （一般为 mRNA) 逆转录成 cDNA ， 然后，通过 PCR 技术，将痕量的 cDNA 扩增 成大量的双链 DNA 。 获得的 dsDNA 可通过测序获得目的基因， 也可用于基因操作。

6. RT － PCR 的步骤 : 从细胞中分离 mRNA 将 mRNA 逆转录成 cDNA 这个步骤与转录是相反的，因此叫逆转录 －逆转录酶来源于病毒 逆转录后，获得了一些微量的 cDNA, 这些 微量的 cDNA 还不足以用来测序。 因此，需要将这些微量的 cDNA 扩增足够的 拷贝才能用于序列测定或基因操作。

7. 逆转录步骤 cDNA 链合成, 互补 mRNA 链，一般利用 polyT 作为引物 ，也可用特异性的序列作为引物 G U A A U C C U CAAAAAAAAAAAAAAA Reverse transcriptase mRNA cDNA T T A G G A G TTTTTTTTTTTTTTT 逆转录 polyT 引物

8. PCR 步骤

9. 电泳分离不同大小的 DNA 片断

10. RT PCR RT-PCR animation http://www.bio.davidson.edu/Courses/gen omics/RTPCR/RT_PCR.htmlhttp://www.bio.davidson.edu/Courses/gen omics/RTPCR/RT_PCR.html