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1)Física: Molécula larga ubicada en espacios pequeños 2)Fisiológica: Regulación de la expresión Compactación del DNA.

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1 1)Física: Molécula larga ubicada en espacios pequeños 2)Fisiológica: Regulación de la expresión Compactación del DNA

2 Compactación de DNA en procariotes DNA E. coli: 1 mm (1 cromosoma) Tamaño de E.coli: 2  m largo,  m ancho Poliaminas Proteínas asociadas H-NS, HU, IHF (similares a histonas) → formación de nucleoides Enzimas Topoisomerasa I (Lk +1 ó -1) DNA girasa (Topoisomerasa tipo II, introduce superenrollamiento a expensas de ATP, Lk -2) Cromosoma E.coli extendido

3 Superenrollamiento de DNA circular

4 se → re → - + M: marcador PM

5 DNA en solución DNA en la célula Papel de topoisomerasas en empaquetamiento de cromosoma bacteriano Empaquetamiento del DNA en la bacteria

6 Cromosoma E.coli parcialmente empaquetado

7

8 Compactación de DNA en eucariotes DNA humano: 2 m Tamaño de núcleo: 10  m diámetro Cromatina (DNA + proteínas) → Empaquetamiento Primer orden de empaquetamiento: Formación de nucleosomas Histonas: Proteínas básicas (ricas en Lys y Arg) DNA extraído a baja concentración salina

9 Octámero: 146 pb Octámero + H1 : 168 pb Empaquetamiento de 7 veces 10 nm

10 Segundo orden de empaquetamiento: fibra de 30 nm (solenoide o espiral) DNA extraído a concentración salina fisiológica Empaquetamiento de 100 veces

11 FISH: hibridación in situ fluorescente

12 Proteínas del “scaffold” o andamiaje: Histona H1 Topoisomerasa II Ordenes superiores de empaquetamiento: asas ancladas en “scaffold” o andamiaje → cromosomas en interfase

13 Cromosomas 18 y 19 de linfocitos humanos en interfase Cromosomas en interfase, no visibles por microscopía regular, pueden ser visualizados por FISH

14 Máxima compactación: cromosomas en mitosis (metafase) Cromosoma: 1 molécula de DNA

15 Tinción de cromosomas en metafase → Bandas características para identificación de cromosomas (cariotipo) y detección de anormalidades Tinción de Giemsa: Bandas G en cromosomas humanos Translocación cromosómica Detección de translocación por FISH

16 Grado de compactación y regulación de la expresión genética compactorelajado

17 Factores de transcripción inducen la remodelación de la cromatina

18 Regulación positiva por acetilación

19 Regulación negativa por desacetilación

20 Silenciamiento de genes por metilación del DNA

21 Identificación de regiones acetiladas en el genoma

22 Modelo de silenciamiento en la heterocromatina Cromatina Eucromatina: transcripción activa Heterocromatina: baja actividad transcripcional


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